刺络放血联合艾灸对肾功能衰竭大鼠肾功能影响的实验研究_电子版书.pdf

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1、2 4 8 天津中医药 2 0 1 0 年 6 月第 2 7 卷第 3 期 T i a n j i n J o u r n a l o f T r a d i t i o n a l C h i n e s e Me d i c i n e J u n 2 0 1 0 V o 1 2 7 N o 3 刺络放血联合艾灸对肾功能衰竭 大 鼠肾功能影 响的 实验研 究木 崔明慧 温景荣 陈静 霞 屈超超 陈爽白 1 天津中医药大学研 究生 天津3 0 0 1 9 3 2 天津 中医药大学 天津3 0 0 1 9 3 摘要 目的 观察刺络放血联合艾灸对实验性慢性肾功能衰竭大鼠肾功能 的影响 方法 将

2、5 4只大 鼠随机分为 3 组 正常组 模型组 刺络放血联合艾灸治疗组 简称刺灸组 采用腺嘌呤溶液灌胃复制慢性肾功能衰竭大鼠模型 刺灸组自造模之 日起予刺络放血联合艾灸治疗 2 1 d 余动物不予任何治疗措施 以肌酐 尿素氮和肾组织的病理学变 化为观察指标 结果 2 1 d 后 模 型组 大鼠存活率 4 5 5 刺灸组大 鼠存 活率 8 1 8 模型组 大鼠肌酐 尿素氮较正常 组均明显上升 具有显著性差异 P 0 0 1 刺灸组尿素氮较模型组有下降趋势 肌酐较模型组下降 具有差异 P 0 0 1 光镜下肾脏组织病理提示 模型组肾小管 明显扩张 肾间质大量 炎细胞浸 润 肾间质纤维化 肾小管和间

3、质可见黄褐色 腺嘌呤结晶 刺灸组亦出现上述病变 病变程度较模型组轻 结论 刺络放血联合艾灸具有减轻腺嘌呤致慢性肾功能 衰竭大鼠肾功能损害和肾脏组织损伤作用的趋势 关键词 刺络放血 艾灸 腺嘌呤 肾功能衰竭 中图分类号 R 6 9 2 5 文献标识码 A 文章编号 1 6 7 2 1 5 1 9 2 0 1 0 0 3 0 2 4 8 0 3 慢性肾功能衰竭 C R F 是多种原发或继发性肾 脏疾病晚期的共 同归宿 是一组 以进行性 肾单位毁 损 从而使肾脏的排泄功能 内环境稳定和内分泌功 能等发生障碍为特征的临床综合征 在治疗上 目 前西 医治疗 尚无突破性进展 发展到晚期 只能求助 于替代疗

4、法 包括血液透析 腹膜透析以及 肾移植 等 而 中医药在 防治 C R F方 面有一定疗效 能够明 显延缓病程进展 已有大量 的临床研究受到 国内外 同行的关注 本研究观察刺络放血联合艾灸对实 验性慢性肾功能衰竭大鼠肾功能的影响 探索延缓 慢性 肾功能衰竭病程进展的新方法 试图为延缓慢 性肾功能衰竭进展开辟新途径 1 材料与方法 1 1 实验动物Wi s t a r 大鼠 S P F级 雄性 8周龄 体质量 2 1 0 1 0 g 由天津山川红实验动物科技有 限公 司提供 许可证编号 S c x k 津 2 0 0 9 0 0 1 1 2 实验试剂腺嘌呤 天津市光复精细化工研究 所 批号 2

5、0 0 8 8 0 5 1 3 实验器具纯艾条 南 阳市卧龙汉医艾绒厂 批号 2 0 0 7 1 1 0 5 三棱针 苏州医疗用品有限公 司 批 号 2 0 0 6 0 7 基金项目 天津市卫生局中医中西医结合基金项目 2 0 0 5 0 6 6 作者简介 崔明慧 1 9 8 3 一 女 2 0 0 7级硕士研究生 主要从事 针灸推拿工作 通讯作者 陈爽 白 1 4 实验仪器石蜡切片机 型号 R M2 2 3 5 德国 L E I C A公司 精密天平 型号 A L 2 0 4 中国梅特勒一 托利多公司 图像分析系统 型号 6 0 0 C L 美国 P i x e r a 公 司 高清 晰度光

6、 学显微镜 型号 B X5 1 日本 O L MP U S 公司 2实验方 法 2 1 分组方法Wi s t a r 大鼠 5 4只 普通饲料适应 性喂养 1 周 编号 称质量 用 S P S S 1 3 0 统计软件将 大 鼠随 机 分 为 3组 即 正 常 组 1 0只 模 型 组 2 2只 刺灸组 2 2只 2 2 造模方法参考 Y o k o z a w a 方法 将 5 0 g腺嘌 呤定溶于 2 L蒸馏水中 制成 2 5 的腺嘌呤溶液 2 L 造模前 各组大鼠禁食 禁水 1 2 h 除正常组外其余 各组大 鼠每天上 午同一时 间按 2 5 0 m s k g d 即 1 0 0 mL

7、 k g d 剂量灌 胃腺嘌呤溶液 共 1 4 d 第 l 5天开始隔天上午灌 胃 1 次 剂量不变 正常组大 鼠每天上午同一时间按 1 0 0 m L k g d 剂量灌 胃蒸 馏水 共 1 4 d 第 1 5 天开始隔天上午同一时间灌胃 1 次 剂量不变 共造模 2 1 d 造模期间 各组大鼠均 给予正常饮食 2 3 治疗方法 2 3 1 穴位穴位 中冲 至阴 涌泉 足三里 命门 和关元 参照 实验针灸学 6 大鼠穴位图谱 同时结 合 比较解剖学方法进行大 鼠穴位 的定位 中冲 前 肢中指指端 至阴 后肢足小趾趾 甲外侧 涌泉 后 2 0 1 0 年 6月第 2 7卷第 3 期 天津中医药

8、 J u n 2 0 1 0 V o 1 2 7 N o 3 T i a n j i n J o u rna l o f T r a d i t i o n a l C h i n e s e Me d i c i n e 2 4 9 肢掌前正中 足三里 膝关节后外侧 在腓骨小头下 约 5 m m处 命 门 后正 中线第二腰椎间隙 关元 当 脐与耻骨联合上缘连线上 3 5折点 处 即脐下约 1 5 m m 处 2 3 2 操作方法 自造模之 日起对刺灸组采取刺络 放血联合艾灸方法进行治疗 刺络放血取 中冲穴 至阴穴和涌泉穴 一助手将大鼠俯 卧固定于桌面上 操作者抬起大鼠前后肢用三棱针对左侧肢体

9、上述三 穴位进行治疗 次 日采取同样方法治疗右侧肢体上 述三穴位 左右交替 每穴放血 1 滴 约 0 0 1 mL 1 次 d 艾灸 取命门穴 关元穴和双侧足三里穴 采 用 自制固定器固定大鼠 四穴同时实施灸法 距离 3 e m 治疗 1 5 m i n 1 次 d 刺络放血联合艾灸方法治 疗共 2 1 d 正常组 模型组大 鼠除每天采取抓取 固 定外 不给予任何干预措施 2 4 观察指标 2 4 1 一般情况每天观察大 鼠的精神状态 皮毛 色 泽 脱毛 反应 活动等变化并记录 每周记录 体质量 1次 每周各组随机 采用 S P S S 1 3 0统计 软 件 取 5只动物入代谢笼 2 4 h

10、 禁食 予 自由饮水 记 录饮水量及尿量 2 4 2 存活率统计 2 1 d内各组大鼠的存活率 2 4 3 生化指标2 1 d后眼底静脉丛取血 2 m L 送 检测肌酐 S c r 尿素氮 B U N 2 4 4 肾脏病理学观察2 1 d后 脱颈椎法处死大 鼠 分离左肾 剥除被膜 观察肾脏大体外观 记录肾 脏体积 质量 对半切开 取一半肾组织固定在 1 0 甲醛溶液 中 7 2 h 取 肾组织 的相同部位 常规 乙醇 脱水 石蜡包埋 切取 5 Ix m厚组织片 H E常规染 色 用光学显微镜观察肾组织的形态学变化 2 5 统计方法数据采用 S P S S 1 3 0统计软件进 行 分析 各检测

11、指标采用均数 4 标准差 表示 组间 差异采用单因素方差分析 P O 0 5说明有差异 3实验结 果 3 1 一般情况造模期间 正常组大 鼠饮食如常 反应灵敏 体毛顺滑有光泽 二便正常 模型组与正 常组 比较 第 5 7天开始出现饮水量 尿量 明显增 多 进食减少 体质量增长减慢 第 1 2 l 4天出现 明 显消瘦 精神萎顿 眯眼 眼睑周 围水肿 倦缩 自主 活动减少 体 毛干枯 脱毛 舌 色紫黯 第 1 7 2 l天 时除上述症状外 出现耳廓 尾部 爪尖苍 白 刺灸 组大 鼠亦出现饮水量 尿量增加 自主活动减少 眯 眼 体毛干枯 脱 毛 等表现 但 出现 时间较 模 型组 晚 2 3 d

12、2 1 d时 刺灸组较模型组 自主活动明显增 多 进食增多 少数动物出现眼睑周围水肿 耳廓 尾 部 爪尖苍 白 且程度较模型组轻 3 2 存活率实验观察期间正常组动物无死亡 模 型组死亡 l 2只 存 活率 4 5 5 死亡动物存活时间 4 5 O O 6 7 d 刺 灸 组 死 亡 动 物 4只 存 活 率 8 1 8 死亡动物平均存活时间 6 2 5 2 2 2 d 模型 组与刺灸组死亡率有差异 尸 0 0 5 3 3 生化指标各组动物 2 1 d时血尿素氮 肌酐的 比较 见表 1 表 1 各组动物 2 1 d时血尿素氮 肌酐比较 Ta b 1 Co n t r o l o f b l o

13、 o d u r e a n i t r o g e n a n d c r e a fi nin e c ont en t a t 21 d i n r a t s o f e ac h g r oup 注 与正 常组 比较 0 0 5 与正 常组 比较 P 0 0 1 与模 型组 比较 P O 0 5 由表 1 可见 模型组尿素氮与正常组 比较有显 著性差异 P 0 O 1 刺灸组与正常组 比较有差异 尸 0 0 5 刺灸组与模型组比较有下降趋势 3 4 肾脏病理学观察 3 4 1 肉眼观察正常组 肾脏正常大小 呈红褐 色 弹性好 表面光滑 有光泽 包膜易于剥离 切面 皮质 髓质分界清楚

14、模型组 肾脏体积 明显增大 颜色苍 白 无弹性 表面呈 细颗粒状 缺乏光泽 呈 大白肾 肾包膜与肾实质粘连不易剥离 切面皮髓 质分界不清 刺灸组 肾脏大体形态基本与模型组 相同 但病变程度相对于模型组有一定减轻 3 4 2 光镜观察HE染色可见 正常组 肾小管和 肾小球无明显病变 间质未见纤维组织增生 无腺嘌 呤结晶 模 型组肾小球大致正常 肾小管扩张 肾间 质炎细胞浸润 肾间质纤维化 肾小管和间质可见黄 褐色腺嘌呤结晶 刺灸组肾小球大致正常 肾小管 扩 张 扩张程度较模型组轻 肾间质炎细胞浸润 肾 间质纤维化程度较模型组轻 肾小管和间质亦可见 黄褐色腺嘌呤结晶 但数 目较模型组少 见图 1

15、4 讨 论 本实验 中 造模后大 鼠出现饮水量 尿量明显增 多 进食减少 明显消瘦 精神萎顿 眯眼 倦缩 自主 活动减少 眼睑周围水肿 体毛干枯 脱 毛 耳廓 尾 部 爪尖苍白等症状 符合大鼠阳虚证的一般表现 天津中医药 T i a n j i n J o u r n a l o f T r a d i t i o n a l C h i n e s e Me d i c i n e 2 0 1 0 年6 月 第2 7 卷第3 期 J u n 2 0 1 0 Vo 1 2 7 No 3 正常组x 2 0 0 模型组x 2 0 0 刺灸组x 2 0 0 图 1 光镜 下肾脏病理图片 HE染色 l

16、 Fi g 1 Th e k i d n e y p a t h o l o g y p i c t u r e a t t h e l i g h t m i c r o s c o p e 虚实夹杂的证候特点 以温补脾 肾 活血 基本治法 运用中药治疗 C R F的研究与报道较多 但 灸治疗 C R F的报道相对较少 本研究在前期 咄 9 J上 以温补脾 肾 活血化瘀 为基本治法 络放血联合艾灸疗法对腺嘌呤致 C R F大 鼠 拘影响 井穴为十二经脉阴阳之气始发之处 气交接于四末之所在 从十二经络的流通顺 太阳膀胱经注入足少阴肾经 足少阴肾经注 凋心包经 足太 阳膀胱经与足少 阳肾经互为

17、此三经与 肾关 系密切 至阴穴 涌泉穴 中 j 0 为足太阳膀胱经 足少阴肾经 手厥阴心包 对此三穴刺络放血以调节全身经脉气血 虫解毒 活血化瘀 的作用 关元穴为元气关 与 肾脏关系密切 命门穴为命门之气出入 I 整肾脏机能的要穴 足三里可以补益中气 灸关元 命门 足三里 可共奏温补脾肾之效 验结果显示 刺络放血联合艾灸有提高腺 C R F大 鼠存活率 降低尿素氮 肌酐升高幅 度 减轻肾功能损害的作用趋势 参考文献 1 国 明俊 盛玉 补 肾 益元 方治 疗早 期 慢性 肾 功能 衰 竭 患者 6 2 例 J 中医杂志 2 0 0 9 5 0 1 1 1 0 0 6 1 0 0 7 2 刘先英

18、 李建英 杜雅静等 补肾排毒合剂对慢性肾功能不全患 者营养状态的影响f J 中华 中医药学刊 2 0 0 7 2 5 6 1 1 7 8 1 1 8 0 3 谢帮军 解毒 祛湿 补 肾活血法 治疗慢性 肾功 能衰竭 早 中期 3 2 例疗效观察 J 1 中国中医急症 2 0 0 8 1 7 4 4 6 4 4 6 5 4 傅贵平 古容芳 郭一 民 等 益肾活血升清泄浊法治疗慢性肾功 能衰竭临床研究f J 上海 中医药杂志 2 0 0 8 4 2 f 5 4 2 4 3 f 5 Y o k o z a w a T Z h e n g P D O u r a H e t a 1 A n i ma

19、l m o d e o f a d e n i n e i n d u c e d c h r o n i c r e n a l f a i l u r e i n r a t J N e p h r o n 1 9 8 6 4 4 2 3 0 2 3 0 6 郭义 实验针灸学 M 北京 中国中医药出版社 2 0 0 7 4 1 7 4 1 7 7 陈奇 中药药理 研究方 法学f J 北 京 人 民卫生 出版社 1 9 9 3 1 0 8 3 1 0 8 3 8 傅 晓晴 林若勤 武一曼 等 腺 嘌呤制作 肾阳虚型慢性 肾功能 衰竭 大 鼠模型 的生 化研 究 J 福建中医学院学报 2 0

20、0 3 1 3 1 2 2 2 4 9 孙燕丽 温景荣 何永生竦0 灸对腺嘌呤致慢性肾功能衰竭大鼠肾 功能影响的研究 J 天津 中医药 2 0 0 8 2 5 6 4 6 2 4 64 收稿 日期 2 0 1 0 0 3 一 l 1 o f t h e c o m b i n a tio n o f Ne e d l i n g a n d M o x i b u s t i o n o n r e n a l f u n c t i o n i n r a t s wi t h a d e n i n e i n d u c e d c hr o n i c r e n a l f a i

21、l u r e C UI Mi n g h u i CHEN S h u a n g b a i CHEN J i n g x i a e t a l T i a r tj i n U n i v e r s i t y o fT C M T i a n j i n 3 0 0 1 9 3 C h i n a Ob j e c ti o n T o o b s e r v e t h e e f f e c t o f t h e c o m b i n a t i o n o f n e e d l i n g a n d m o x i b u s t i o n o n r e n a

22、l f u n c t i o n i n r a t s w i t h c h r o n i c r e n a l 4 e t h o d s T h e 5 4 w i s t a r r a t s we r e r a n d o ml y d i v i d e d i n t o b l a n k g r o u p mo d e l g r o u p a n d p r i e k i n g b l o o d a n d mo x i b u s t i o n i n g g r o u p n a 1 f a i l u r e i n r a t s w a

23、s i n d u c e d w i t h a d e n i n e P r i c k i n g b l o o d a n d mo x i b u s t i o n i n g g r o u p c a r r i e d o n p r i c k i n g b l o o d a n d mo x i b u s a t me n t w h i l e b l a n k g r o u p a n d mo d e l g r o u p d i d n o t g i v e a n y t r e a t me n t T h e g e n e r a l s

24、 i t u a t i o n c r e a t i n i n e l e v e l b l o o d u r e a n i t r o i d n e y t i s s u e p a t h o l o g i c a l l e v e l w e r e o b s e r v e d Re s u l ts A ft e r t w e n t y o n e d a y s s u r v i v a l r a t e o f m o d e l g r o u p w a s 4 5 5 a n d t h a t g b l o o d a n d mo x i

25、 b u s t i o n i n g g r o u p w a s 8 1 8 T h e c r e a t i n i n e a n d b l o o d u r e a n i t r o g e n o f mo d e l gro u p a s c e n d e d o b v i o u s l y a n d 3 c a n t d i f f e r e n c e c o m p a r e d w i t h b l a n k g r o u p 0 0 1 T h e c r e a t i n i n e l e v e l o f p r i c k

26、i n g b l o o d a n d m o x i b u s t i o n i n g g r o u p o f F o u p w a s l o we r t h a n mo d e l g r o u p b u t i t w a s n o t s i g n i fi c a n t l y d i f f e r e n t i n t wo gro u p s W e c o u l d s e e f r o m t h e r e n a l p a tho l o g y t h a t ti e s o f mo d e 1 g r o u p b r

27、o a d e n o b v i o u s l y Re n a l i n t e r s t i t i a l i n fla mma t o r y c e l l i n f i l t r a t i o n a n d fi b r o s i s i n r e n a l i n t e r s t i t i a l s u b s t a n c e mu p T h e r e a r e a gre a t q u a n t i t y o f y e l l o w b r o w n a d e n i n e c r y s t a l l i z a t

28、 i o n s i n r e n a l t u b u l e s a n d i n t e r s t i t i a l s u b s t a n c e o f mo d e l e s a m e p a t h o l o g i c a l c h a n g e s a l s o e x i t i n p r i c k i n g b l o o d a n d mo x i b u s t i o n i n g g r o u p b u t l e s s s e v e r e l y t h a n mo d e l g r o u p C o n c

29、l u c o mb i n a t i o n o f n e e d l i n g a n d mo x i b u s t i o n ma y l e s s e n t h e d a ma g e o f r e n a l f u n c t i o n a l l e s i o n a n d t h e d a ma g e o f r e n a l t i s s u e i n h a d e n i n e I s p r i c k i n g b l o o d mo x i b u s t i o n a d e n i n e c h r o n i c r e n a l f a i l u r e